利用微流控芯片可實(shí)現(xiàn)多重尿路感染病原鑒定與抗生素感性測(cè)試
尿路感染是非常常見的感染性疾病,多由細(xì)菌引起。臨床治療尿路感染病例時(shí),醫(yī)生需要了解病原菌的種類、數(shù)量以及對(duì)于抗生素的敏感性,以便進(jìn)行針對(duì)性治療。因此,臨床上的細(xì)菌檢測(cè)平臺(tái),需要具備多重病原菌快速定性與定量分析以及抗生素敏感性測(cè)試的功能。
傳統(tǒng)的尿路感染病原菌鑒定及抗生素敏感性試驗(yàn)主要采用平板培養(yǎng)法,但是耗時(shí)較長(zhǎng),不利于及時(shí)診斷和抗生素選擇指導(dǎo)。近年開發(fā)出了尿路感染病原菌檢測(cè)新方法,如免疫熒光法、干化學(xué)分析法、流式細(xì)胞法、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、質(zhì)譜法及新一代測(cè)序技術(shù)等,雖然可以顯著縮短檢測(cè)時(shí)間,但這些方法大多依賴于大型或者精密設(shè)備,難以在基層醫(yī)療單位推廣。因此,急需簡(jiǎn)便、快速的尿路感染病原菌檢測(cè)方法。
近年發(fā)展起來的微流控芯片細(xì)菌分析技術(shù)較之傳統(tǒng)方法具有很多優(yōu)勢(shì)。首先,芯片細(xì)菌分析平臺(tái)小巧便攜,操作簡(jiǎn)便,非常適用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè);其次,芯片微分析平臺(tái)有利于提高測(cè)試通量和降低試樣消耗量,便于實(shí)現(xiàn)高通量分析;此外,大多數(shù)芯片細(xì)菌分析方法可以免去預(yù)增菌步驟,因而可以顯著縮短分析時(shí)間。因此,微流控芯片技術(shù)為細(xì)菌分析提供了一種理想的解決方案。然而,目前報(bào)道的微流控芯片細(xì)菌分析大多只針對(duì)單一種類細(xì)菌檢測(cè),無法滿足臨床上對(duì)病原菌的分析需求。
研究人員研發(fā)出了一種微流控芯片紙基細(xì)菌分析方法,在芯片培養(yǎng)池中以濾紙作為襯底組合固定菌種特異性顯色培養(yǎng)基和抗生素。濾紙成分為纖維素,具有疏松多孔結(jié)構(gòu),不僅具有良好的生物相容性,而且易于固定試劑,借助芯片集成PVDF疏水薄膜止流閥,引入芯片的尿液樣品被分隔于不同培養(yǎng)池,以實(shí)現(xiàn)多重顯色反應(yīng)。根據(jù)特異性顯色結(jié)果實(shí)現(xiàn)細(xì)菌定性鑒定,通過實(shí)時(shí)顯色強(qiáng)度分析實(shí)現(xiàn)細(xì)菌定量測(cè)定,依據(jù)抑制顯色反應(yīng)的最低抗生素濃度確定抗生素敏感性,因此在芯片上實(shí)現(xiàn)了多重細(xì)菌的同時(shí)定性與定量分析和AST。
此次研發(fā)出的微流控芯片多重細(xì)菌鑒定和AST方法,具有操作簡(jiǎn)單、耗時(shí)短、低消耗和高通量的優(yōu)勢(shì),適用于醫(yī)療資源匱乏條件下的細(xì)菌分析。
標(biāo)簽:   微流控芯片 微流控