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微流控聚合酶鏈式反應平臺有望早期檢測新生兒敗血癥


在美國華盛頓2022年國際膿毒癥周上發(fā)表的一項研究中顯示,數(shù)字微流體(DMF)設備可將細菌檢測時間縮短9小時,加快新生兒敗血癥的診斷。

該設備結(jié)合了血液培養(yǎng)和基于聚合酶鏈反應(PCR)的病原體鑒定,具有定制的血液培養(yǎng)箱。這個培養(yǎng)箱與一個一次性的墨盒相連,用來進行樣品制備和PCR。

二氧化碳培養(yǎng)箱.png

汶顥細胞培養(yǎng)箱

據(jù)該研究的主要作者、嬰兒公司的創(chuàng)始人Vamsee Pamula博士說,DMF裝置利用PCR的敏感性來確定血液培養(yǎng)瓶中的生長,而不是熒光。因此,病原體鑒定時間從12小時縮短到3小時。

Pamula補充說:“早期使用抗生素顯著降低了嬰兒死亡率和發(fā)病率的風險,因此,加快培養(yǎng)到鑒定的過程是非??扇〉??!?/span>

為了測試該設備,Pamula和同事們將肺炎克雷伯氏菌接種到標準血液培養(yǎng)瓶中,然后將其在DMF設備或傳統(tǒng)血液培養(yǎng)設備(BD BACTEC 9050)中培養(yǎng)。他們在3、4和5小時從DMF瓶中提取樣本,并裝入盒中進行自動樣本處理和PCR。

使用循環(huán)閾值確定時間到陽性,并與傳統(tǒng)方法進行比較,傳統(tǒng)方法使用血液培養(yǎng)瓶中的熒光,然后在單獨的設備上進行PCR。
使用DMF裝置,在接種5個重復的肺炎克雷伯菌樣本后3小時就可以檢測到細菌的存在。相比之下,傳統(tǒng)方法(培養(yǎng)10.5 h, PCR鑒定2 h)的檢測時間超過12小時。“我們分別在接種后3、4和5小時觀察Ct值為34、31和28。誤差條表示在每個時間點上所有5個重復的重復性?!?/span>

此外,他指出,DMF和傳統(tǒng)血液培養(yǎng)設備對所有五種導致新生兒敗血癥的常見病原體(肺炎克雷伯菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌、表皮葡萄球菌)具有相似的生長曲線。
據(jù)Pamula稱,據(jù)我們所知,這是第一次使用集成的微流控聚合酶鏈式反應平臺來加快培養(yǎng)和鑒定。

敗血癥是新生兒死亡和發(fā)病的主要原因之一,對于少數(shù)真正感染的嬰兒來說,抗生素可能是挽救生命的方法。
Pamula認為,通過加快培養(yǎng)到鑒定,他們的設備將有助于防止對臨床懷疑有敗血癥但血培養(yǎng)陰性的嬰兒進行經(jīng)驗性抗生素治療。這應該可以避免與長期接觸抗生素相關的不良后果,包括破壞發(fā)育中的微生物群和增加抗生素耐藥性基因的攜帶。

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